人間の生活に影響を与える環境要因の中で、空気は主要な位置を占めています。 空気微生物叢を研究する科学は、空気微生物学と呼ばれます。
空気には微生物が含まれていないため、微生物の繁殖にとって好ましい環境ではありません。 栄養素そして常に動き続けています。 したがって、ほとんどの微生物はすぐに空気中から消えてしまいます。 しかし、それらの中には、結核菌、クロストリジウム菌の胞子、真菌などのより安定したものもあり、空気中に長期間残留することができます。
森林や野原の空気よりも都市の空気の方が微生物が多く存在します。
空気中の微生物の数は高度が上がるにつれて減少します。 たとえば、モスクワの上空500メートルでは、空気1立方メートル中に2〜3個の細菌が検出されますが、高度1000メートルではその半分の数になります。
屋内エリアの微生物の数は、通常、屋外エリアの空気よりも多くなります。
GOST は大気試験の実施方法を標準化していません。 これまで、ヒトの鼻咽頭に存在する微生物叢による室内空気汚染の指標として溶血性連鎖球菌の同定に多くの注目が払われていました。 現在、空気中の病原性微生物や日和見微生物を直接検出することに、より注目が集まっています。
衛生的および細菌学的空気検査は、病院、手術室、児童施設などで計画どおりに実施されます。
衛生および細菌学的研究では、次のことが決定されます。
1. 空気 1 m 3 中の細菌の総数。
2. 1 m 3 の空気中に病原性微生物および条件付き病原性微生物が存在する。
空気中の微生物の検出は、 特別な装置および特殊な環境（診断および鑑別診断）。
空気サンプリング方法
研究のための空気サンプリングには主に 2 つの方法があります。1) 沈降 - 微生物の機械的沈降に基づく。 2）吸引 - 空気の積極的な吸引に基づいています（この方法により、細菌の定性的な含有量だけでなく、定量的な含有量も決定できます）。
沈降法
栄養培地（MPA）を入れたペトリ皿を オープンフォーム水平方向、床とは異なるレベル。 この方法は、ペトリ皿内の寒天表面上の細菌の機械的沈降に基づいています。 予想される大気汚染に応じて、培地の入ったカップを 10 ～ 20 分間さらします。 病原菌叢を特定するには、選択培地が使用されます。 これらの場合の曝露は2〜3時間に延長され、曝露後、皿は閉じられ、実験室に運ばれ、温度37℃の恒温槽に24時間置かれます。翌日、成長したコロニーが研究されます。 。 この方法は主に密閉された空間で使用されます。
(吸引法 )
レチメンスキー細菌トラップ。 使用前に、デバイスには滅菌ソーダが充填されます。 装置の動作は、アスピレーターを使用して装置を通して空気を吸引することに基づいています。 この場合、装置内の液体が噴霧されます。 吸引終了後、空気を通した液をシャーレにMPA当たり0.1～0.2ml接種する。 選択培地を使用する必要がある場合は、種子の投与量を増やします (0.3 ～ 0.5 ml)。 レシーバーで得られた液体は、動物を感染させるために使用できます（たとえば、ウイルス、リケッチアなどを特定するために行われる研究など）。
ディアコノフの装置も、空気を通過させる液体中に細菌を捕捉することに基づいています。
PAB-1 デバイスは以下を対象としています。 細菌学的研究短時間に大量の空気を吹き込みます。 空気サンプルは 125 ～ 150 l/分の速度で採取されます。 この装置の動作原理は、逆の電荷を有する電極上に微生物を捕捉することに基づいています。 この装置の空気サンプリングの高速性と、それをさまざまな物質に接種する能力 栄養培地病原性細菌や日和見細菌（例えば、外科における緑膿菌など）の検出に重要です。
クロトフの装置。 この動作は、空気のジェットがペトリ皿内の培地に当たる原理に基づいています。 この装置は、空気サンプリング用のユニット、回転計、供給機構の電気部分の 3 つの部分で構成されています。
4000 ～ 5000 rpm の速度で回転する遠心ファンを使用して、テスト対象の空気がデバイスのスロットに吸い込まれ、培地が入った開いたペトリ皿の表面に当たります。 空気中に含まれる微生物が寒天培地上に定着します。 微生物を表面全体に均一に行き渡らせるために、カップを置いたテーブルが回転します。 空気は、装置を通過する空気の速度を示す回転計に接続されたエア チューブを通じて装置から除去されます。
クロトフの装置の欠点は、電力を必要とするため、あらゆる状況で使用できるわけではないことです。
研究の初日
選択したサンプルを 37°C のサーモスタットに 18 ～ 24 時間置きます。
研修２日目
皿をサーモスタットから取り出し、コロニーを数えます。 細菌による大気汚染は、1m 3 中の微生物の総数で表されます。
計算。 たとえば、10 分間に 125 リットルの空気が通過すると、表面に 100 個のコロニーが成長しました。
黄色ブドウ球菌を測定するには、卵黄塩寒天上でサンプルを収集します。 接種したディッシュを37℃のサーモスタット内で24時間インキュベートし、 室温色素を識別するためです。 黄色ブドウ球菌であると疑われるコロニーはさらに特定する必要があります (第 14 章を参照)。
児童施設では、空気中のサルモネラ菌の有無が検査されます。 これを行うには、亜硫酸ビスマス寒天培地の入った皿に空気を接種します。
密閉空間の空気中の病原性細菌やウイルスの検出は、疫学的指標に従って行われます。 結核の病原体を特定するには、POV 装置が使用されます。捕集媒体としてシュコルニコワ培地が使用されます。
コントロールの質問
1. 空気は微生物の発育に好ましい環境ですか?
2. 空気微生物叢の日常的な研究を行っている機関はどこですか?
3. クロトフ装置の構造を説明してください。
タスク
10分間で250リットルの空気が通過しました。 150個のコロニーが成長しました。 空気1m中のコロニーの数を計算します。
エクササイズ
MPA 培地の入ったペトリ皿を 4 枚用意し、開いて床から異なる高さに置きます。 20分後、カップを閉めてサーモスタットに置きます。 翌日、成長したコロニーの数を数え、大気汚染の程度を判断します。
大規模な機器および装置のグループは、環境物体 (水、空気) からのサンプル、および患者からの病理学的物質のサンプル中の微生物を濃縮することを目的としています。
知られているように、環境物体が病原性微生物に汚染されている場合、人間や動物の集団感染源となる可能性があります。 環境物体中の病原性微生物の存在を判断するための最も信頼できる基準は、それらを直接検出することです。 ただし、微生物学の実践で使用される方法では、これが常に可能であるとは限りません。 病原性微生物は腐生植物よりもはるかに少ないため、環境物体から特定するのは困難です。 したがって、栄養培地に対する拮抗作用により、病原性微生物叢の増殖は腐生植物の増殖によって抑制されることがよくあります。 空気などの環境物体を研究する場合の主な作業は、少量の液体 (栄養培地) に浮遊している微生物の濃度を調べることです。
環境対象物の細菌汚染を示す主な指標の 1 つは、微生物数指標です。 このデータ 衛生微生物学ペトリ皿上で増殖したコロニーを数え、その後再計算することによって記録されます。
かなりの数の研究が空気サンプリング法に捧げられています。 細菌エアロゾルを捕捉する多数のさまざまな装置が提案されている。
我が国で大量生産に導入された、大気微生物相を研究するための最初の機器の 1 つは、クロトフ装置でした。 連続生産が開始されてから (1950 年代) 比較的長い時間が経過しているにもかかわらず、この装置は室内空気の衛生状態および細菌学的状態の研究においてその重要性を失っていません。 今日衛生研究所や細菌研究所の実践で広く使用されています。
空気の細菌分析装置（クロトフの装置）（図58）は蓋で閉じられたシリンダーであり、その下に高密度の栄養培地を入れたペトリ皿を置くためのテーブルがあります。 シリンダー内には、カップを備えたテーブルを回転させる電気モーターと、蓋のスロットから空気を装置に吸い込むタービンが組み込まれています。 1分間に吸い込まれる空気の量はフロート流量計によって測定され、バルブを使用して調整されます。 デバイスは主電源から電力を供給されます 交流電流電圧 220 V。ケース内のデバイスの寸法 -229X200X280 mm。 重量 - 8kg。
米。 58. 空気の細菌学的分析のための装置。
1 - 回転計バルブ、2 - 回転計; 3 - キャップロック。 4 - 回転ディスク。 5 - カバー。 6 - ディスク。 7 - くさび形のギャップ。 8 - 本体。 9 - ベース。
装置の操作準備は、直径 100 mm、高さ 20 mm の標準的なシャーレを選択し、あらかじめ 15 ml の量の栄養培地を満たしておきます。 栄養培地の充填と冷却は厳密に水平な表面で行われ、通常の条件下で乾燥されます。
同様の目的のための別のデバイスは次のとおりです。 エアサンプラー POV-1(図59)。
米。 59. エアサンプラー POV-1
空気サンプルは液体栄養培地に取り込まれ、これにより特定の選択培地を使用し、特別な（標的を絞った）細菌学的研究を行うことが可能になります。
技術仕様デバイスPOV-1
容量.......20リットル/分
AC電源....127/220V
消費電力……18VA以下
装置の寸法...................................170x255x285 mm
» 敷設....................................170X270X350 »
重量（梱包含む）................................15kg以内
エアサンプリングアスピレーター モデル 822、クラスノグヴァルディーツ協会によって作成された、空気中に含まれる不純物の分析を目的としています。 デバイスの前面パネル (図 60) には、デバイスをネットワークに接続するためのブロック 1、デバイスのオンとオフを切り替えるためのトグル スイッチ 2、ヒューズ ソケット 3、電気を保護するアンロード バルブがあります。低速で空気サンプルを採取するときにモーターが過負荷にならないようにする 4、空気流量を決定するための回転計（フロート付き円錐ガラス管） 5、サンプリング速度を調整するための回転計バルブハンドル 6、パネルを装置ケーシングに固定するためのネジ 7、フィッティングゴムチューブとフィルターを接続するための8および装置を接地するための端子9。
米。 60. 空気サンプリング用のアスピレーター。 本文中の説明。
図では、 図６１は、フィルターホルダーを備えたアスピレーターの全体図を示す。
サンプリングは、空気を特殊なフィルターを通して一定の速度で吸引することによって行われます。 フィルターを通過する空気は、それに含まれる不純物を残します。 空気の速度と通過時間を知ることで、フィルターを通過する空気の量を決定できます。 フィルター上の不純物の量を測定することで、空気の単位体積あたりの不純物の量を計算できます。
エアサンプリングアスピレータフランスのボードール社が製造。 アスピレーターは、細孔フィルターを強化するための装置を備えた密閉装置であり、アスピレーターを通じて一定量の空気を吸引した後、フィルターを簡単に取り外すことができ、研究の目的に応じて、細菌学的（フィルターを微生物と培養する）研究が行われます。栄養培地中で）または顕微鏡で（フィルターに保持された粒子の性質の決定、それらの計数など）。
使用される微細多孔質フィルターは紙またはグラスファイバーのいずれかです。 フィルターの直径は110mmです。
遠心ファンには 2 つの速度があり、220 V の主電源電圧から電力を供給できるように設計されています。 モーター出力 - 50 W; アスピレーターの生産性 - 使用する微細孔フィルターの抵抗に応じて、360 ～ 1000 l/min。
水やその他の環境物体（土壌）、ならびに人間や動物の体液（喀痰、滲出液、浸出液）を研究して病原菌叢の存在を調べる場合は、空気の研究と同様に、少量の微生物を予備濃縮します。栄養培地の補充が必要であり、その後細菌学的検査（顕微鏡検査、培養、生化学的および血清学的反応など）が行われます。
米。 61. フィルターホルダー付きアスピレーター。
しかし、環境物体から微生物を濃縮する方法の分野における進歩は小さく、ほとんどの場合、さまざまな蓄積方法を代表する古い方法に限定されなければなりません。
- 機械的方法による沈降 - 濾過、遠心分離、水の蒸発。
- さまざまな凝集剤を使用した物理的および化学的方法による微生物の沈降。
- 浮選法による微生物の濃縮。
- 特定の凝集血清による微生物の沈殿。
- 沈殿法とその後の栄養培地への播種または感受性実験動物の感染の組み合わせからなる、微生物を濃縮するための組み合わせ方法の使用。
微生物を濃縮するための新しい方法は、特定の物理原理の応用に基づいています。 そのような物理原理の 1 つが電気泳動です。 この方法を使用すると、電極に加えられる外部起電力 (EMF) の影響下で、液体媒体中にある電極の 1 つに微生物細胞が確実に移動します。 この原理は EFM-1 デバイスの基礎を形成します (図 62)。 この装置を使用すると、正または負の表面電荷を持つ微生物細胞を少量の分離液体 (0.01 ～ 0.02 ml) に濃縮できます。
米。 62. マイコバクテリアEFM-1の電気泳動用装置。
水の研究に加えて、この装置は、食品の水性懸濁液、さまざまな洗浄液などの細菌学的研究にも使用できます。この装置は、患者から採取したさまざまな物質中の微生物の検出、特に結核菌の検出にも使用できます。脳脊髄液、気管支および胃の洗浄水、あらゆる種類の点状物質、尿などの物質に含まれます。 生理食塩水中の結核菌の懸濁液から調製され、電気泳動濃縮された塗抹標本では、微生物細胞の数は、天然材料からの塗抹標本と比較して 10 ～ 15 倍増加します。
このデバイスには、容量 12 ml の壊れないキュベット 20 個、電極、ピペットなどの付属品セットが装備されています。 このデバイスは、220 V±10%、50 Hz の AC 電圧から電力を供給されます。 消費電力 - 20 W以下。 寸法 - 405X165X205 mm。 付属品一式を含むデバイスの重量は 6 kg です。
装置の動作原理。 10 ml の試験物質を、装置に付属の特別なキュベットに注ぎます。 グラファイト電極が配置されたピペットは、クランプ ホルダーを使用して各キュベットの上に固定されます。 試験対象の液体の一部がピペットの毛細管に沿って 4 ～ 5 mm 上昇し、電極に接触します。 研究の目的に応じて、印加されるEMFの極性が確立されます。 電気泳動は 1 ～ 3 時間行うことをお勧めします。
電流を止めた後、ゴム風船を使って毛細管からの液体を絞り出し、血清（通常の馬またはウサギの血清を 1:10 に希釈したもの） 1 滴の中に入れ、あらかじめスライドガラスの表面に塗布し、よく混合します。パスツールピペットを密封し、調製物を乾燥させ、バーナーの炎の上に固定し、グラム法、ツィール・ニールセン法または別の方法に従って染色する。
可能性を排除するには 診断エラー、すべての操作は慎重に処理されたキュベット、ピペット、スライドガラスを使用して行われます。 グラファイト電極は研究ごとに交換する必要があります。
塗料と酸の溶液は、細菌学的に注意深く検査する必要があります。
増殖した微生物コロニーの計数の精度を高めるために、キエフ医療機器工場では細菌コロニーを計数するための装置を製造しています。 電気ペンでコロニーをカウントするには、電気ペンの接点が閉じられ、カウンターが受信した電気パルスがカウントを生成する間に、各コロニーの位置でカップの底にドットがマークされます。図 63 に示します。
米。 63. コロニー計数装置。
閉じた皿上のコロニーの数を数えるには、鉛筆またはペンを使用して皿の裏側に印を付けます。これにより、同じコロニーを二度計数する可能性がなくなります。
バクトロニック栄養培地上のコロニーを計数するためのユニバーサルカウンターオープンプレート上のコロニー数を計数するための電子チップが装備されています。 寒天培地と接触すると、チップは電磁計数機構を作動させ、培地の表面に跡を残します。
このデバイスは、他のシステムを使用するときに発生する放電を排除します。
まばらに増殖したプレート上のコロニー数をカウントする場合、計器パネルのボタンと、必要に応じてリモートの押しボタン スイッチを使用することができ、作業が容易になります。
ミリポア社は特別な製品を製造しています。 微生物研究用スーツケース。 本質的には持ち運び可能な実験室であるスーツケース (図 64) は、すべての機能を提供します。 必要な材料また、水の細菌汚染を研究し、空気中や土壌中の微生物を検出し、温度と細菌の増殖を監視し、環境中の酵母を特定し、酵母によるガス生成を確認し、消毒剤の有効性を判断するための機器も含まれます。
米。 64. 微生物研究用の保管ケース。
食品の品質を判断するために発行される 照度鏡 LPK-1。 その助けを借りて、肉の種類、豚肉と豚肉の脂肪の早期腐敗、ひき肉の成分の比率、食用油、脂肪、蜂蜜、その他の製品の検査を決定することができます（図65）。
この装置は視覚発光分析の原理を使用しています。 紫外線の影響下で、食品はその特性と品質に応じてさまざまな色に輝き始め、光フィルターがスペクトルの対応する部分を強調表示します。 この装置を使用するとき、部屋を暗くする必要はなく、研究者は紫外線にさらされることがありません。
デバイスの動作モードは断続的です。 作業時間 - 1 時間、休憩 - 25 分。 製品リサーチには 1 分もかかりません。 このデバイスは、AC 主電源 - 220 V±10% から電力を供給されます。 消費電力 - 350 W以下。 全体の寸法 - 366X185X240 mm。 重量 - 6kg。
米。 65.製品の品質を決定するための装置LPK-1。
大規模な機器および装置のグループは、環境物体 (水、空気) からのサンプル、および患者からの病理学的物質のサンプル中の微生物を濃縮することを目的としています。
知られているように、環境物体が病原性微生物に汚染されている場合、人間や動物の集団感染源となる可能性があります。 環境物体中の病原性微生物の存在を判断するための最も信頼できる基準は、それらを直接検出することです。 ただし、微生物学の実践で使用される方法では、これが常に可能であるとは限りません。 病原性微生物は腐生植物よりもはるかに少ないため、環境物体から特定するのは困難です。 したがって、栄養培地に対する拮抗作用により、病原性微生物叢の増殖は腐生植物の増殖によって抑制されることがよくあります。 空気などの環境物体を研究する場合の主な作業は、少量の液体 (栄養培地) に浮遊している微生物の濃度を調べることです。
環境対象物の細菌汚染を示す主な指標の 1 つは、微生物数指標です。 これらの衛生微生物学データは、ペトリ皿上で増殖したコロニーを数え、その後再計算することによって記録されます。
かなりの数の研究が空気サンプリング法に捧げられています。 細菌エアロゾルを捕捉する多数のさまざまな装置が提案されている。
我が国で大量生産に導入された、大気微生物相を研究するための最初の機器の 1 つは、クロトフ装置でした。 連続生産が開始されてから（1950 年代）比較的長い時間が経過しているにもかかわらず、この装置は室内空気の衛生的および細菌学的状態の研究における重要性を失っておらず、今でも衛生的および細菌学的検査の現場で広く使用されています。研究室。
空気の細菌分析装置（クロトフの装置）（図58）は蓋で閉じられたシリンダーであり、その下に高密度の栄養培地を入れたペトリ皿を置くためのテーブルがあります。 シリンダー内には、カップを備えたテーブルを回転させる電気モーターと、蓋のスロットから空気を装置に吸い込むタービンが組み込まれています。 1分間に吸い込まれる空気の量はフロート流量計によって測定され、バルブを使用して調整されます。 このデバイスは 220 V AC 主電源から電力を供給されます。ケース内のデバイスの寸法は 229X200X280 mm です。 重量 - 8kg。
米。 58. 空気の細菌学的分析のための装置。
1 - 回転計バルブ、2 - 回転計; 3 - キャップロック。 4 - 回転ディスク。 5 - カバー。 6 - ディスク。 7 - くさび形のギャップ。 8 - 本体。 9 - ベース。
装置の操作準備は、直径 100 mm、高さ 20 mm の標準的なシャーレを選択し、あらかじめ 15 ml の量の栄養培地を満たしておきます。 栄養培地の充填と冷却は厳密に水平な表面で行われ、通常の条件下で乾燥されます。
同様の目的のための別のデバイスは次のとおりです。 エアサンプラー POV-1(図59)。
米。 59. エアサンプラー POV-1
空気サンプルは液体栄養培地に取り込まれ、これにより特定の選択培地を使用し、特別な（標的を絞った）細菌学的研究を行うことが可能になります。
POV-1デバイスの技術的特徴
容量…………20リットル/分
AC電源…127/220V
消費電力…………18VA以下
装置の寸法……………………..170x255x285 mm
» 敷設…………………………..170X270X350 »
重量（梱包含む）……………………..15kg以内
エアサンプリングアスピレーター モデル 822、クラスノグヴァルディーツ協会によって作成された、空気中に含まれる不純物の分析を目的としています。 デバイスの前面パネル (図 60) には、デバイスをネットワークに接続するためのブロック 1、デバイスのオンとオフを切り替えるためのトグル スイッチ 2、ヒューズ ソケット 3、電気を保護するアンロード バルブがあります。低速で空気サンプルを採取するときにモーターが過負荷にならないようにする 4、空気流量を決定するための回転計（フロート付き円錐ガラス管） 5、サンプリング速度を調整するための回転計バルブハンドル 6、パネルを装置ケーシングに固定するためのネジ 7、フィッティングゴムチューブとフィルターを接続するための8および装置を接地するための端子9。
米。 60. 空気サンプリング用のアスピレーター。 本文中の説明。
図では、 図６１は、フィルターホルダーを備えたアスピレーターの全体図を示す。
サンプリングは、空気を特殊なフィルターを通して一定の速度で吸引することによって行われます。 フィルターを通過する空気は、それに含まれる不純物を残します。 空気の速度と通過時間を知ることで、フィルターを通過する空気の量を決定できます。 フィルター上の不純物の量を測定することで、空気の単位体積あたりの不純物の量を計算できます。
エアサンプリングアスピレータフランスのボードール社が製造。 アスピレーターは、細孔フィルターを強化するための装置を備えた密閉装置であり、アスピレーターを通じて一定量の空気を吸引した後、フィルターを簡単に取り外すことができ、研究の目的に応じて、細菌学的（フィルターを微生物と培養する）研究が行われます。栄養培地中で）または顕微鏡で（フィルターに保持された粒子の性質の決定、それらの計数など）。
使用される微細多孔質フィルターは紙またはグラスファイバーのいずれかです。 フィルターの直径は110mmです。
遠心ファンには 2 つの速度があり、220 V の主電源電圧から電力を供給できるように設計されています。 モーター出力 - 50 W; アスピレーターの生産性 - 使用する微細孔フィルターの抵抗に応じて、360 ～ 1000 l/min。
水やその他の環境物体（土壌）、ならびに人間や動物の体液（喀痰、滲出液、浸出液）を研究して病原菌叢の存在を調べる場合は、空気の研究と同様に、少量の微生物を予備濃縮します。栄養培地の補充が必要であり、その後細菌学的検査（顕微鏡検査、培養、生化学的および血清学的反応など）が行われます。
米。 61. フィルターホルダー付きアスピレーター。
しかし、環境物体から微生物を濃縮する方法の分野における進歩は小さく、ほとんどの場合、さまざまな蓄積方法を代表する古い方法に限定されなければなりません。
- 機械的方法による沈降 - 濾過、遠心分離、水の蒸発。
- さまざまな凝集剤を使用した物理的および化学的方法による微生物の沈降。
- 浮選法による微生物の濃縮。
- 特定の凝集血清による微生物の沈殿。
- 沈殿法とその後の栄養培地への播種または感受性実験動物の感染の組み合わせからなる、微生物を濃縮するための組み合わせ方法の使用。
微生物を濃縮するための新しい方法は、特定の物理原理の応用に基づいています。 そのような物理原理の 1 つが電気泳動です。 この方法を使用すると、電極に加えられる外部起電力 (EMF) の影響下で、液体媒体中にある電極の 1 つに微生物細胞が確実に移動します。 この原理は EFM-1 デバイスの基礎を形成します (図 62)。 この装置を使用すると、正または負の表面電荷を持つ微生物細胞を少量の分離液体 (0.01 ～ 0.02 ml) に濃縮できます。
米。 62. マイコバクテリアEFM-1の電気泳動用装置。
水の研究に加えて、この装置は、食品の水性懸濁液、さまざまな洗浄液などの細菌学的研究にも使用できます。この装置は、患者から採取したさまざまな物質中の微生物の検出、特に結核菌の検出にも使用できます。脳脊髄液、気管支および胃の洗浄水、あらゆる種類の点状物質、尿などの物質に含まれます。 生理食塩水中の結核菌の懸濁液から調製され、電気泳動濃縮された塗抹標本では、微生物細胞の数は、天然材料からの塗抹標本と比較して 10 ～ 15 倍増加します。
このデバイスには、容量 12 ml の壊れないキュベット 20 個、電極、ピペットなどの付属品セットが装備されています。 このデバイスは、電圧 220 V±10%、50 Hz の交流ネットワークから電力を供給されます。 消費電力 - 20 W以下。 寸法 - 405X165X205 mm。 付属品一式を含むデバイスの重量は 6 kg です。
装置の動作原理。 10 ml の試験物質を、装置に付属の特別なキュベットに注ぎます。 グラファイト電極が配置されたピペットは、クランプ ホルダーを使用して各キュベットの上に固定されます。 試験対象の液体の一部がピペットの毛細管に沿って 4 ～ 5 mm 上昇し、電極に接触します。 研究の目的に応じて、印加されるEMFの極性が確立されます。 電気泳動は 1 ～ 3 時間行うことをお勧めします。
電流を止めた後、ゴム風船を使って毛細管からの液体を絞り出し、血清（通常の馬またはウサギの血清を 1:10 に希釈したもの） 1 滴の中に入れ、あらかじめスライドガラスの表面に塗布し、よく混合します。パスツールピペットを密封し、調製物を乾燥させ、バーナーの炎の上に固定し、グラム法、ツィール・ニールセン法または別の方法に従って染色する。
診断エラーの可能性を排除するために、すべての操作は慎重に処理されたキュベット、ピペット、スライドガラスを使用して行われます。 グラファイト電極は研究ごとに交換する必要があります。
塗料と酸の溶液は、細菌学的に注意深く検査する必要があります。
増殖した微生物コロニーの計数の精度を高めるために、キエフ医療機器工場では細菌コロニーを計数するための装置を製造しています。 電気ペンでコロニーをカウントするには、電気ペンの接点が閉じられ、カウンターが受信した電気パルスがカウントを生成する間に、各コロニーの位置でカップの底にドットがマークされます。図 63 に示します。
米。 63. コロニー計数装置。
閉じた皿上のコロニーの数を数えるには、鉛筆またはペンを使用して皿の裏側に印を付けます。これにより、同じコロニーを二度計数する可能性がなくなります。
バクトロニック栄養培地上のコロニーを計数するためのユニバーサルカウンターオープンプレート上のコロニー数を計数するための電子チップが装備されています。 寒天培地と接触すると、チップは電磁計数機構を作動させ、培地の表面に跡を残します。
このデバイスは、他のシステムを使用するときに発生する放電を排除します。
まばらに増殖したプレート上のコロニー数をカウントする場合、計器パネルのボタンと、必要に応じてリモートの押しボタン スイッチを使用することができ、作業が容易になります。
ミリポア社は特別な製品を製造しています。 微生物研究用スーツケース。 スーツケースは本質的に持ち運び可能な実験室であり（図64）、水の細菌汚染の研究、空気および土壌中の微生物の検出、温度と細菌の増殖の監視、酵母の同定に必要なすべての材料と機器を提供します。環境中の真菌、酵母によるガス生成、消毒剤の有効性の決定など。
米。 64. 微生物研究用の保管ケース。
食品の品質を判断するために発行される 照度鏡 LPK-1。 その助けを借りて、肉の種類、豚肉と豚肉の脂肪の早期腐敗、ひき肉の成分の比率、食用油、脂肪、蜂蜜、その他の製品の検査を決定することができます（図65）。
この装置は視覚発光分析の原理を使用しています。 紫外線の影響下で、食品はその特性と品質に応じてさまざまな色に輝き始め、光フィルターがスペクトルの対応する部分を強調表示します。 この装置を使用するとき、部屋を暗くする必要はなく、研究者は紫外線にさらされることがありません。
デバイスの動作モードは断続的です。 作業時間 - 1 時間、休憩 - 25 分。 製品リサーチには 1 分もかかりません。 このデバイスは、AC 主電源 - 220 V±10% から電力を供給されます。 消費電力 - 350 W以下。 全体の寸法 - 366X185X240 mm。 重量 - 6kg。
米。 65.製品の品質を決定するための装置LPK-1。
講義を検索する
空気の衛生検査と微生物検査は分けて行うことができます 4段階に分けて：
1) サンプリング。
2) サンプルの処理、輸送、保管、微生物の濃縮物の取得（必要な場合）。
3）細菌学的播種、微生物の培養。
4) 分離された培養物の同定。
サンプルの選択:
適切なサンプリングにより、研究の正確さが保証されます。 密閉空間では、サンプリング ポイントは、封筒のように、面積 20 m2 ごとに 1 つの空気サンプルの割合で設定されます。部屋の隅に 4 つのポイント (壁から 0.5 m の距離) と部屋の 5 番目のポイントです。中心。 空気サンプルは床から 1.6 ～ 1.8 m の高さ、つまり住宅敷地内の呼吸レベルで採取されます。 サンプルは日中（人間の活動が活発な時間帯）に、部屋の湿式清掃と換気を行った後に採取する必要があります。 大気空気微生物相への影響を評価するために、汚染源近くの地面から 0.5 ～ 2 m の住宅地や緑地 (公園、庭園など) で検査されます。
空気サンプルを採取する場合、多くの場合、それを栄養培地に接種することに注意してください。
沈降- 最も古い方法であり、そのシンプルさとアクセシビリティにより広く普及していますが、不正確です。 この方法は R. Koch によって提案され、重力の影響下および空気の動き (塵粒子やエアロゾル液滴とともに) の影響下で微生物が開いたペトリ皿内の栄養培地の表面に定着する能力に基づいています。 カップは水平面上のサンプリングポイントに設置されます。
衛生微生物学用の機器および装置
総微生物汚染を測定する場合、肉ペプトン寒天培地を含むプレートは、細菌汚染の疑いの程度に応じて 5 ～ 10 分間、またはそれ以上開いたままにされます。 衛生的とされる微生物を同定するには、ガロ培地またはトゥルジェツキー培地 (連鎖球菌の検出用)、乳塩寒天培地または卵黄塩寒天培地 (ブドウ球菌の検出用)、麦芽寒天培地またはサブロー培地 (酵母菌および真菌の検出用) を使用します。 衛生指標微生物を測定する場合、カップは 40 ～ 60 分間開いたままにします。
曝露の終了後、すべての皿を閉じ、分離された微生物の発育に最適な温度で培養するためにサーモスタット内に 1 日置き、その後 (研究で必要な場合) 形成のために室温で 48 時間放置します。色素形成微生物による色素の生成。
沈降法には多くの欠点があります。エアロゾルの粗い部分のみが媒体の表面に沈降します。 コロニーは単一の細胞からではなく、微生物の集団から形成されることがよくあります。 空気微生物叢の一部だけが、使用される栄養培地で増殖します。 さらに、この方法は大気中の細菌汚染を研究するのにはまったく適していません。
より高度な方法は、 願望、空気中から高密度の栄養培地の表面または捕捉液体（肉ペプトンブロス、緩衝液、等張塩化ナトリウム溶液など）への微生物の強制堆積に基づいています。 吸引サンプリング中の衛生サービスの実践では、クロトフ装置、レクメンスキー細菌トラップ、空気サンプリング装置 (POV-1)、エアロゾル細菌サンプラー (PAB-1)、細菌ウイルス電気沈降装置 (BVEP-1)、キクテンコ装置、 Andersen 装置、Dyakonova、MB などが使用されます。大気を研究するには、Seitz 装置を使用して空気を吸引する膜フィルター No. 4 も使用できます。 楽器の種類が豊富であるということは、汎用的な装置が存在しないことと、多かれ少なかれその不完全性を示しています。
クロトフの装置。現在、この装置は室内空気の研究に広く使用されており、研究室でも利用できます。
クロトフの装置
クロトフ装置の動作原理（図 22）は、装置の蓋にあるくさび形のスロットを通して吸引された空気が栄養培地の表面に衝突し、塵やエアロゾルの粒子が付着するという事実に基づいています。培地に、そして空気中の微生物とともに。
細菌ウイルス電気沈降装置 (BVEP-1)。この装置は、吸引イオン化の動作原理に基づいています。 BVEP-1 は、電極が取り付けられた沈殿チャンバーで構成されます。空気が流入する導管の形をしたマイナスのチャンバーと、細菌が定着するプラスのチャンバーです。
MB デバイス。この装置は、一般的な微生物汚染を測定するだけでなく、さまざまなサイズのエアロゾル粒子を含む空気サンプルを採取するのにも役立ちます。 MB 装置は「ふるい」の原理に基づいて構築されており、6 つの水平ストリップに分割されたシリンダーであり、それぞれのストリップ上に MPA を含むペトリ皿が配置されます。 空気は上段の穴の大きいプレートから吸い込まれ、下段になるほど空気が吸い込まれます。 サイズが小さい穴（空気エアロゾルの細かく分散した部分のみが後者を通過します）。 この装置は、30 l/分の空気サンプリング速度でサイズ 1 ミクロンを超えるエアロゾル粒子を捕捉するように設計されています。 穴の数を減らすと、空気からのエアロゾルが栄養培地全体にさらに均一に分布します。 さらに小さなエアロゾル粒子を捕捉するには、AFA フィルター素材で作られた追加のフィルターを追加できます。
リストされている装置のいずれかを使用すると、得られる結果は近似値ですが、沈降法と比較して大気汚染のより正確な評価が得られます。 空気のサンプリングと衛生微生物学的研究はいずれも GOST によって規制されていないため、細菌による大気汚染の評価にはあらゆる装置を使用できます。 多くの場合、サンプリングは接種段階と組み合わされます。
密閉空間の空気中の微生物の数を減らすために、次の手段が使用されます: a) 化学的処理 - オゾン、二酸化窒素による処理、乳酸の噴霧、b) 機械的 - 特殊なフィルターに空気を通過させる、c) 物理的 - 紫外線照射。
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主題。 室内空気微生物叢の分析。
仕事の目標:
— プレート法を用いた微生物の定量測定におけるスキルと能力の習得。
タスク:
カップ法を使用して空気中の微生物を測定するための定量的方法を研究します。
— 空気から微生物の播種を実行します いろいろな部屋沈降法;
— オメリャンスキーの法則に従って植民地を数えます。
この方法の本質:
— まず、研究対象の基質を高密度栄養培地とともにペトリ皿に接種します。 作物は温度調節されており、成長したコロニーが数えられます。 この方法は、体内の微生物を測定するために広く使用されています。 食品、水、空気。
空気微生物叢
微生物による大気汚染空気生物学の法則に従っており、本質的に不安定で局所的です。 夏には、冬に比べて空気の汚染が数倍高くなります。 大都市の上空の空気は特に微生物で飽和しています。 大気の微生物叢と住宅空気の微生物叢は異なります。
大気中の微生物叢。 大気中では、混雑した場所で採取されたサンプルのわずか 3.7% にブドウ球菌と連鎖球菌が検出されます。 微生物の中では土壌に生息する種が主流です。 大気中には主に 3 つのグループの微生物が存在します。
色素形成球菌晴れた日には、それらは全植物相の最大 70 ～ 80% を占めます (色素は細菌を日射から守ります)。
・土壌胞子と腐敗微生物。 乾燥した風の強い天候では、その含有量が急激に増加します。
・カビと酵母。 空気湿度が上昇すると、それらの含有量が増加します。
室内の空気とは違い、、自己浄化プロセスは大気中で常に発生します。 このプロセスは、降水量、日射量、温度の影響などの要因によって発生します。 また、大気自体も住宅敷地内の空気を浄化する要因となります。
室内空気の微生物叢より均一で比較的安定しています。 微生物の中では、咳、くしゃみ、または会話の際に空気中に侵入する病原性種を含む、人間の鼻咽頭の常在菌が多数を占めています。
室内空気の細菌学的制御方法
病原性種による大気汚染の主な原因は、保菌者です。 微生物汚染のレベルは主に、人口密度、人の往来、粉塵汚染、換気、換気の頻度、清掃方法、照明の程度、その他の条件を含む敷地の衛生状態に依存します。 したがって、施設の定期的な換気と湿式清掃により、空気汚染が 30 分の 1 (制御室と比較して) 削減されます。 室内空気の自己浄化は起こりません。
微生物のコロニーの兆候。
コロニーの重要な特徴は、そのサイズと形状です。 コロニーは大きくても小さくても構いません。
コロニーの大きさ、コロニーの大きさは、異なる種、属、さらには種類の細菌を区別することを可能にする標識です。 ほとんどの場合、グラム陽性菌のコロニーはグラム陰性菌のコロニーよりも小さいです。
細菌のコロニー平坦、隆起、凸状、中央が凹んだり隆起したりすることができます。
もう一つの重要な兆候は、 コロニーの端の形状。 勉強するとき コロニーの形態マット、光沢、滑らか、または粗いなどの表面の性質を考慮してください。 植民地時代の端滑らか、波状、裂け目（深いカット）、ギザギザ、浸食、縁取りなどがあります。
微生物数の測定
部屋の空気の中で。
空気は栄養素が不足し、最適な温度が一定に保たれないため、微生物にとっては好ましくない環境です。
住宅および住宅内の空気の衛生評価 生産施設総微生物数（TMC）に従って実行されます。 工業用施設の空気では、TMC はオメリャンスキー法を使用して空気の単位体積ごとに決定されます。 沈降法。 この方法は、重力の影響下で微生物が定着して落下する能力に基づいています。
オメリャンスキーの法則:
この規則に基づいて、彼は空気 1 m3 中の微生物の数を計算する式を導き出しました。
バツ– 空気1平方メートル中の微生物の数
あ– 分析中にペトリ皿上で増殖したコロニーの数
100 – 10 dm3 から 1 m3 に換算するための数値
5 – オメリャンスキー時間係数
100 – オメリャンスキーペトリ皿の面積（cm2）
で– 分析のために採取されたペトリ皿の面積 (cm2)
t– カップが開いていた時間 (分) (5 分)。
進捗
1. 微生物を増殖させるための濃厚な栄養培地を準備します - MPA (ミートペプトン寒天): スキームに従って、MPA を蒸留水 (3.8 g の乾燥 MPA + 100 ml の蒸留水) に溶解し、30 分間沸騰させ、わずかに冷却し、滅菌カップペトリに注ぎます。 MPA がカップの底で固まった後、高密度培地を乾燥させる必要があります。 乾燥キャビネット 45℃の温度で10分間（寒天プレートを下に向ける必要があります）。
2. 教育機関のさまざまな部屋の空気から微生物を接種します。研究中の部屋で培地を入れたペトリ皿を 5 分間開き、閉じてサーモスタット (30℃) に 72 時間置き、TMC を測定し、酵母を測定します。そして型を作ります - (250℃で) 5〜7日間。 温度調節はペトリ皿を逆さにすることによって実行されます。
3. 温度調節後、ペトリ皿上で増殖したコロニーをカウントし、オメリャンスキーの法則に従って空気 1 m2 ごとに再計算します。 コロニーカウントは、コロニーカウンターを使用して実行されます。 数を数えるとき、カップは暗い背景に下から上に置かれます。
コロニーを数えるときは、次のルールに従います。
— 少数のコロニー (最大 100) がプレート上で増殖した場合、すべてのコロニーがカウントされます。
- コロニーが均等に分布しており、その数が約 200 ～ 300 である場合、カップをマーカーで 6 つのセクターに分割し、反対側の 2 つのセクターにあるコロニーを数え、平均を計算して 6 を掛けます。
結論
によると 規制文書, 室内の空気は、1 m3 中に最大 2000 個の細菌が含まれている場合にきれいであると考えられます。
空中の食べ物 制作ワークショップ生産の性質に応じて、1 m3 あたり 100 ～ 500 個以下の細菌を含む必要があります。 食品企業の空気中では、食品を腐敗させる物質（カビや酵母）の含有量が標準化されています。
コントロールの質問
1. 空気微生物叢はどのような要因に依存しますか?
2. 微生物による大気汚染の程度を判断するにはどうすればよいですか?
3. 最も多くの場合病原性を示す微生物はどのような形態ですか?
実験室ワークNo.12
B. 空気サンプリング方法
1. 重力法これは、空気中に浮遊している高密度の粒子が重力の影響下で沈降するという事実に基づいています。 重力法を使用してサンプルを収集するには、ダーラムサンプラーが使用されます (図 3.1 を参照)。 グリセリンゲルでコーティングされたスライドガラスをデバイスホルダーに挿入します。このホルダーは次のように調製されます。5 g のゼラチン、40 ml の水、4 g のフェノールを 195 g のグリセリンと混合し、加熱します。 加熱中に、２ｍｌのカルベリウム溶液、５ｍｌのグリセリン、１０ｍｌの９５％エチルアルコールおよび２滴の塩基性フクシンの飽和水溶液をゲルに導入する。 デバイスは空気中に 24 時間放置され、空気流によって運ばれた粒子が重力の影響でスライドガラス上に沈降します。 粒子の組成と数は顕微鏡で測定されます。 結果は、24 時間で 1 cm2 あたりに堆積する粒子の数として表されます。この方法は簡単で安価ですが、次のような欠点があります。
A.研究結果は、風向と風速、湿度、降水量の影響を受けます。
b. 24 時間以内に、少量の粒子が沈降します。
V.ほとんどの大きな粒子はガラス上に沈降します。
2. 容積測定法これは、空気中に浮遊する粒子が空気流の経路に配置された障害物によって保持されるという事実に基づいています。
A. ロータリーサンプラー。特殊な物質でコーティングされた捕集面が一定速度で一定時間回転します。 試験結果は、24 時間で 1 cm2 あたりに堆積した粒子の数として表されます。この方法では、研究結果に対する風速と風向の影響が排除されます。 Rotorod サンプルコレクター (Sampling Technologies Inc.、図 3.2) では、収集表面はシリコン潤滑剤の薄層でコーティングされたアクリルロッドです。 他の装置では、収集面は常に回転するのではなく、回転間のオーバーフローを避けるために定期的にフラップで覆われます。 米国アレルギー免疫学会は、これらのデバイスを標準の体積サンプラーとして使用することを推奨しています。
b. 吸引サンプラー既知の細孔径を持つ膜フィルターに空気を通過させ、所定のサイズの粒子が収集表面に沈降します。 バーチャード胞子トラップはこの原理に基づいており（図 3.3 参照）、捕集面が 2 mm/h の速度で移動するため、観察全体を通して空気中の粒子濃度の変化を監視することができます。期間。 風向計が付いているため、試験結果は風向きの影響を受けません。 より複雑な AkkuVol サンプラー (図 3.4 を参照) は、直径 1 ミクロン未満の粒子を捕捉します。
結果の評価
A.重力法を使用すると、大気サンプルからブタクサの花粉などの大きな粒子 (直径 20 ミクロン以上) のみを検出できます。 科学的な目的では、より正確な容積測定法が使用されます。 真菌の胞子と花粉を特定するためのガイドラインがあります。 大気サンプルの定量的顕微鏡検査の結果から編集された表により、一年のうちのさまざまな州における花粉および真菌の胞子の濃度の季節的ピークを決定することができます（付録 VI を参照）。 アトピー性疾患の悪化と、定量的な顕微鏡検査を使用して測定される空気中のアレルゲンの一日平均濃度との間に明確な関係はありません。 これは、アレルゲンの一日平均濃度が低い場合、その濃度の短期的な増加によってアトピー性疾患の悪化が引き起こされる可能性があるという事実によって説明されます。 さらに、定量的な顕微鏡検査では、空気中のアレルゲンの濃度を常に正確に評価できるわけではありません。
b.免疫学的方法を使用してアレルゲンを定量するには、標識抗体が使用されます。 免疫学的方法によって測定されるアレルゲンの濃度と、アトピー性疾患、特に外因性気管支喘息の悪化との間に関連性が確立されている。 しかし、そのような研究はほとんどなく、ブタクサの E 抗原、昆虫および Alternaria 属の真菌のアレルゲンに関するデータのみが発表されています。 動物や昆虫の表皮の粒子など、顕微鏡では検出できない空気中のアレルゲンを研究するための免疫学的方法は、非常に正確です。 場合によっては、これらの研究によりアレルギーの原因が特定できる場合があります。
B. 花粉アレルゲン。花粉は多くの花粉粒で構成されており、 雄の配偶子そして種子植物の有性生殖に役立ちます。 昆虫媒介性（昆虫媒介）植物では、明るい色と 香りのよい花花粉は大きく、粘着性があり、通常、短距離に広がり、空気中の濃度は低いです。 風媒性（風媒性）植物は、小さく目立たず、無臭の花を持ち、花粉は小さく、ベタつかず、滑らかで、 平面。 開花期の空気中の花粉の濃度は昆虫菌性植物の花粉の濃度よりもはるかに高いため、アレルギーの原因は通常、風媒性植物の花粉です。 ほとんどの風媒性植物の花粉の放出は早朝に起こりますが、空気中の花粉濃度は通常、午後または夕方にピークに達します。 これは、日中の空気循環が増加するという事実によるものです。 乾燥した天候では、たとえ弱い風でも花粉が長距離に飛散する可能性があるため、大都市であっても空気中の花粉濃度が非常に高くなることがあります。 花粉は数時間後には生存能力を失いますが、そのアレルギー誘発性は長期間持続します。 付録 VI には、米国とカナダの植物マップとリストが含まれています。 開花植物、さまざまな植物地域に分布しています。
1. アンブロシア. 主な理由米国におけるアレルギー性鼻結膜炎は、キク科のブタクサ花粉（Ambrosia spp.）によって引き起こされます。 米国北東部とミシシッピ川流域では、この地域の肥沃な耕作土壌がブタクサの生育に理想的であるため、ブタクサが特に広く普及しています。 ブタクサの花粉抗原には、抗原 E (Amb aI) と抗原 K (Amb aII) の 2 つがあります。
すべての空気サンプリング方法は、沈降法と吸引法に分類できます。
どちらもよく研究されています。 抗原 E は分子量 37,800 のポリペプチドであり、抗原 K は分子量 38,000 のポリペプチドです。抗原 E は花粉抽出物のタンパク質画分のわずか 6% しか占めませんが、抗原 K よりも 200 倍活性が高いです。
2. シリアル。穀物花粉は区別が難しい 形態的特徴したがって、空気サンプルでそれが検出された場合、まず、特定の地域でどの穀物が一般的であるかを考慮します。
A.アメリカ南部と南海岸では 太平洋ピグラスはミシシッピ川流域の北東部と北部に広く分布しており、ブルーグラス、チモシーグラス、コックフットグラス、ホワイトベントグラスが挙げられます（付録 VI を参照）。
b.穀物を含むイネ科の花粉に対するアレルギーは、気候条件に依存する開花期にのみ発症するため、地域ごとに発生率のピークが季節ごとに異なります。 したがって、北部地域では発生率のピークは春と夏に発生しますが、南部地域では増悪の頻度は年間を通じてほとんど変化しません。 の上 高地ロッキー山脈などの海抜高度、 北部の州米国（ウィスコンシン、ミシガン、メイン）の花粉濃度は低い。
V.米国では、イネ科の花粉は、それが引き起こすアレルギー反応の頻度と重症度において、ブタクサ花粉に次いで第2位にランクされています。 他の国では、それは最も重要な空気感染アレルゲンです。
G.ブルーグラス、チモシーグラス、ホワイトベントグラス、ハリネズミグラスの花粉は類似の抗原を持っており、交差アレルギー反応を引き起こします。 アカザの花粉は、他のイネ科の花粉とは抗原組成が大きく異なり、交差反応を引き起こしません。
3. 木。アレルギーは通常、風媒性の樹木からの花粉によって引き起こされます。 果物や観賞用の木などの昆虫媒介性の木からの花粉がアレルギーを引き起こすことは非常にまれです。 緻密な外殻で覆われた風媒性の樹木からの花粉もアレルギーを引き起こしません。
A.さまざまな樹木からの花粉には明確な形態学的特徴があります。 さらに、木によって開花の期間、強さ、季節も異なります。
b.木の花粉なので 異なる属交差抗原がほとんどなく、1つの植物相領域内では通常、特定の属の木が優勢であり、その中では1つの属のみの木の花粉に対するアレルギーが存在します。
V.樹木の開花期間は通常短いため、花粉に対するアレルギーの悪化も短期間で済みます。
G.咲く 落葉樹葉の出現前、出現中、または出現直後に始まります。 のある地域では、 温暖な気候開花期は晩春に終わり、木々が葉で完全に覆われます。 暖かい地域では、開花期が長く続きます（付録 VI を参照）。
1. キノコの構造。形態学的特徴によれば、すべての真菌は酵母と菌糸体に分けられます。 酵母は、分裂または出芽によって無性生殖する個々の細胞で構成されています。 糸状菌は多細胞生物に属し、胞子を形成できる分岐糸のネットワークである菌糸を表します。 真菌の胞子は水、風、動物によって広がります。 カビは、栄養基質の表面にある生殖器官です。 他の種類きのこ カビは絡み合った菌糸と胞子で構成され、不定形の塊です。 異なる色、形状と一貫性。 カビは分類学的ではなく、カビを形成する菌類の伝統的な名前です。
2. きのこの分類再現方法に基づいています。 真菌は菌糸と胞子の断片化によって繁殖し、無性生殖（単純な細胞分裂）および有性生殖（接合子を形成するための2つの細胞の融合）によって形成されます。 で ライフサイクルほとんどの菌類は、無性生殖 - 不完全段階 - と有性生殖 - 完全段階 - の段階を交互に繰り返します。 現代の分類によれば、真菌は子嚢菌類、担子菌類、接合菌類、卵菌類の 4 つのクラスに分類されます。 Alternaria 属、Penicillium 属、Aspergillus 属の菌類は、以前は不完全菌類 (無性生殖のみで繁殖する不完全な菌類) に属していましたが、現代の分類によれば、それらは子嚢菌類のサブクラス Hyphomycetes に含まれています (表 3.1 を参照)。 アレルギーを引き起こすことが最も多いのはこれらのキノコです。 糸状菌の分類は胞子の形態のみに基づいており、他の性質は反映されていないため、 さまざまなキノコこのサブクラスに含まれる、抗原組成が互いに大きく異なります。
3. 真菌の蔓延。キノコはその膨大な多様性と、さまざまな気候で生き残る優れた能力により、どこにでも存在します。 それらは低温でも生存し続けます。 水分と酸素が十分でない乾燥した高山地域には、ほんのわずかしか存在しません。 家に生息する真菌は、一年を通じて起こるアレルギー性疾患の原因となることがよくあります。 住宅地では、古い家具の室内装飾品、室内の加湿器、シャワーカーテン、配管設備、ゴミ箱、生ゴミ、湿気の多い地下室などに特に多くのキノコが存在します。
4. キノコとの接触。真菌によって引き起こされるアレルギー疾患は、森林や農場を訪れた後、干し草や穀物を収穫した後、落ち葉を集めた後、湿気の多い暖かい夏や秋の葉が落ちた後など、空気中の真菌濃度の増加によって引き起こされる周期的な増悪を伴います。落下します（表 3.1 を参照）。 穀物栽培者、庭師、製紙工場の労働者など、特定の職業の代表者は、特にキノコと接触する可能性が高くなります。 キノコに対するアレルギーのいわゆる新年の悪化は、トウヒの木にキノコがたくさんあるという事実と、松葉の刺激的な匂いと、そこからの塵のせいです。 クリスマスの飾り病気の悪化に寄与します。 真菌を制御する方法については、第 1 章で概説されています。 4、段落III.D。
5. 実験室での研究。キノコに対するアレルギーを防ぐ最善の方法は、環境中のキノコの含有量を常に監視し、キノコと戦うことです。 臨床検査は、1) 外因性アレルギー性肺胞炎などのアレルギー疾患を引き起こす真菌を特定する、2) 真菌制御の有効性を評価する、3) 地域で一般的な真菌の種類を特定するために必要です。
浮遊真菌の定量は、容積測定法を使用して得られたサンプルと、これらのサンプルを接種して得られた培養物の顕微鏡検査に基づいています。 キノコの栽培には、サブロー培地や片栗粉やトウモロコシ粉を加えた寒天が通常使用されます。 キノコの識別には時間、特別な機器、専門的なスキルが必要です。 温度、空気湿度などの特定の栽培条件を考慮する必要があります。 大気圧、臨床的に重要ではない真菌の増殖を促進します。 特にアレルギーを引き起こすことが多いカビを表に示します。 3.1 および付録 VI。
D. 表皮アレルゲン。ほとんどの場合、アレルギーは犬や猫の表皮のほか、家具、枕、羽毛ベッドの詰め物に使用される羊毛（ヤギや羊が最も多い）や羽毛（アヒルなど）によって引き起こされます。 最も強力なアレルゲンは水溶性であり、加工中に除去されるため、処理された羊毛や皮はアレルギーを引き起こす可能性が低くなります。 多くの表皮アレルゲンは動物の唾液や尿にも含まれています。 表皮アレルゲンは非常に活性が高く、短時間接触しただけでも重度のアレルギー反応を引き起こす可能性があります。 最も活性の高い表皮アレルゲンには、猫表皮抗原が含まれます。 猫の表皮の粒子は非常に小さく（2.5ミクロン未満）、空気中にゆっくりと沈降して蓄積するため、猫が住んでいる部屋に短期間滞在しただけでも激しいアレルギー反応を引き起こす可能性があります。 これらは表皮アレルゲンであるため、毛が抜けない長毛種と短毛種の両方でアレルギーが引き起こされます。 住宅やアパートでは、中央システムによって表皮アレルゲンの蔓延が促進されます。 空気加熱。 施設の清掃や動物の洗浄は、一時的で効果のない抗アレルギー対策です。 表皮アレルゲンは職業性アレルギー疾患を引き起こす可能性があります。 アパートや管理の悪い建物に住んでいる人は、げっ歯類の表皮や尿に対してアレルギー反応を起こすことがよくあります。
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空気アスピレーターおよびサンプリング装置
大気サンプルは、通常は吸引によって、限られた容量の容器に取り込まれます。 この方法は、吸収溶液または大きな吸収表面を持つ固体吸着剤 (シリカゲル、アルミニウムゲル、活性炭など) を使用した分析物の抽出に基づいています。 微細繊維（酢酸セルロース、ポリアクリロニトリル、ポリアクリレートなど）で作られたフィルター材の使用も普及しています。 すべての分析研究と同様に、適切なサンプリングが重要です。 サンプル収集の準備が正しくなく、不適切に実行された場合、最も正確で慎重に実行された分析の結果はまったく意味を失います。 通常、空気サンプリングの場所は、すぐ近くに木や建物の壁がないように選択する必要があります。 雨や降雪時にはサンプリングを実行しないでください。 サンプリングの際には、汚染物質の凝集状態や性質を把握することも考慮する必要があります。 ほとんどの場合、サンプリングプロセス中に空気を直接分析する場合、測定すべき空気成分の分離と濃縮が実行されます。 決定される大気汚染物質の予想レベルに応じて、サンプリングは濃縮の有無にかかわらず実行できます。 後者の場合、ガラス注射器、ガスピペット、ポリマーフィルム製バッグ、ゴムチャンバーなどが、微量不純物を濃縮するために従来の固体吸着剤および吸収溶液として使用される。 空気は、吸着剤または吸収溶液を通して、一定の速度で一定時間引き込まれます。 サンプリングの際には、統計的に平均化されたサンプルを取得する必要があります。 統計的に平均化された空気サンプルは、大量の空気サンプルを特殊なフィルターまたは液体吸収体に送り込み、吸収された汚染物質を特殊な溶液で洗い流すことによって取得できます。 場合によっては、吸収体フィルターを灰化したり、直接分析したりすることができます (たとえば、中性子放射化法によって)。 従来の吸着剤を使用して大気汚染物質の濃度を高め、その後の脱着と定量化を行うことは、 準備段階ガスクロマトグラフィー分析まで。 気液クロマトグラフィーを使用して空気中に含まれる低濃度の物質を測定する場合、2 つの主な前濃縮方法が使用されます。 第一の方法によれば、分析される空気は、吸着剤が測定される物質で完全に飽和するような量で濃縮装置を通過する。 ほとんどの場合、この場合、冷却が使用されます（液体窒素、アセトンを含むドライアイス）。 低揮発性物質の分析に最適な方法です。 第２の方法によれば、分析された空気は、吸着剤と気相との間で平衡が生じるような量で濃縮器を通過する。 この方法は主に空気中の揮発性の高い物質の測定に適しています。 作業領域。 大気中の分析物質の濃度 (C、mg/m 3) は、式 C = m/V を使用して計算されます。ここで、m は分析サンプルに含まれる物質の質量、μg、 V – 研究対象の空気サンプルの体積を次のように換算します。 通常の状態(t = 0 ℃、p0 = 101080 Pa)、l。 V = 273 p Vt / 、ここで、p – サンプリング中の大気圧、Pa; t – サンプリング場所の気温、℃; Vt – 温度 t、l における空気サンプルの体積。
吸引法には多くの欠点があります。第一に、労働集約的であり、第二に、吸引に長い時間 (最大 30 分) を必要とするため、有毒物質の濃度が平均化され、有害物質の濃度が平均化される可能性があります。空気中の物質は非常に急速に変化します。
7)大気汚染の判定方法
大気の環境モニタリングには、汚染源の研究、汚染物質の化学的および光化学的変化の研究、最も有毒な物質の特定、空気流による大気中の汚染物質の分布の研究、濃度の測定が含まれます。汚染物質の量と大気汚染の影響による生態系の変化の予測。 汚染物質を含む空気の分析は、一方では複雑な多成分混合物を分析する必要があり、他方では、空気中の濃度が MPC レベルで有害な物質を選択的に決定する必要があるため、非常に複雑です。下に。 さらに、測定は長時間であってはなりません（GOST によれば、サンプリング時間は 30 分を超えてはなりません）。 サンプルの準備は、大気汚染物質の分析に使用される方法によって異なります。 汚染物質の性質と空気中の濃度に応じて、ガスクロマトグラフィー、気液クロマトグラフィー、中性子放射化法、原子吸光法、ポーラログラフ法、測光法、分光測光法、その他の方法が使用されます。 大気汚染の測定には、次の作業が含まれます。空気のサンプリングと有害物質の微量不純物の濃度。 分析のためのサンプルの準備。 微量不純物の分析、分析結果の処理、および環境状態の変化の予測。 大気サンプルは、通常は吸引によって、限られた容量の容器に取り込まれます。 この方法は、吸収溶液または大きな吸収表面を持つ固体吸着剤 (シリカゲル、アルミニウムゲル、活性炭など) を使用した分析物の抽出に基づいています。 微細繊維（酢酸セルロース、ポリアクリロニトリル、ポリアクリレートなど）で作られたフィルター材の使用も普及しています。 すべての分析研究と同様に、適切なサンプリングが重要です。 サンプル収集の準備が正しくなく、不適切に実行された場合、最も正確で慎重に実行された分析の結果はまったく意味を失います。 通常、空気サンプリングの場所は、すぐ近くに木や建物の壁がないように選択する必要があります。 雨や降雪時にはサンプリングを実行しないでください。 サンプリングの際には、汚染物質の凝集状態や性質を把握することも考慮する必要があります。 ほとんどの場合、サンプリングプロセス中に空気を直接分析する場合、測定すべき空気成分の分離と濃縮が実行されます。 決定される大気汚染物質の予想レベルに応じて、サンプリングは濃縮の有無にかかわらず実行できます。 後者の場合、ガラス注射器、ガスピペット、ポリマーフィルム製バッグ、ゴムチャンバーなどが、微量不純物を濃縮するために従来の固体吸着剤および吸収溶液として使用される。 空気は、吸着剤または吸収溶液を通して、一定の速度で一定時間引き込まれます。 サンプリングの際には、統計的に平均化されたサンプルを取得する必要があります。 統計的に平均化された空気サンプルは、大量の空気サンプルを特殊なフィルターまたは液体吸収体に送り込み、吸収された汚染物質を特殊な溶液で洗い流すことによって取得できます。 場合によっては、吸収体フィルターを灰化したり、直接分析したりすることができます (たとえば、中性子放射化法によって)。 その後の脱着と定量を目的として、従来の吸着剤を使用して大気汚染物質の濃度を高めることは、ガスクロマトグラフィー分析の準備段階です。 気液クロマトグラフィーを使用して空気中に含まれる低濃度の物質を測定する場合、2 つの主な前濃縮方法が使用されます。 第一の方法によれば、分析される空気は、吸着剤が測定される物質で完全に飽和するような量で濃縮装置を通過する。 ほとんどの場合、この場合、冷却が使用されます（液体窒素、アセトンを含むドライアイス）。 低揮発性物質の分析に最適な方法です。 第２の方法によれば、分析された空気は、吸着剤と気相との間で平衡が生じるような量で濃縮器を通過する。 この方法は主に作業場の空気中の揮発性の高い物質を測定するのに適しています。 大気中の分析物質の濃度 (C、mg/m 3) は、式 C = m/V を使用して計算されます。ここで、m は分析サンプルに含まれる物質の質量、μg、 V – 通常の状態（t = 0 °C、p0 = 101080 Pa）に換算した、研究中の空気サンプルの体積、l。 V = 273 p Vt / 、ここで、p – サンプリング中の大気圧、Pa; t – サンプリング場所の気温、℃; Vt – 温度 t、l における空気サンプルの体積。
空気の衛生学的および細菌学的研究 - F. K. Cherkes
人間の生活に影響を与える環境要因の中で、空気は主要な位置を占めています。 空気微生物叢を研究する科学は、空気微生物学と呼ばれます。
空気は栄養素を含まず常に動いているため、微生物の発育には好ましい環境ではありません。 したがって、ほとんどの微生物はすぐに空気中から消えてしまいます。 しかし、それらの中には、結核菌、クロストリジウム菌の胞子、真菌などのより安定したものもあり、空気中に長期間残留することができます。
森林や野原の空気よりも都市の空気の方が微生物が多く存在します。
空気中の微生物の数は高度が上がるにつれて減少します。 たとえば、モスクワの上空500メートルでは、空気1立方メートル中に2〜3個の細菌が検出されますが、標高1000メートルではその半分の数になります。
屋内エリアの微生物の数は、通常、屋外エリアの空気よりも多くなります。
GOST は大気試験の実施方法を標準化していません。 これまで、ヒトの鼻咽頭に存在する微生物叢による室内空気汚染の指標として溶血性連鎖球菌の同定に多くの注目が払われていました。 現在、空気中の病原性微生物や日和見微生物を直接検出することに、より注目が集まっています。
衛生的および細菌学的空気検査は、病院、手術室、児童施設などで計画どおりに実施されます。
衛生および細菌学的研究では、次のことが決定されます。
1. 空気 1 m3 中の細菌の総数。
2. 1 m3 の空気中に病原性微生物および条件付き病原性微生物が存在する。
空気中の微生物の検出は、特別な機器と特別な媒体（診断および鑑別診断）を使用して実行されます。
空気サンプリング方法
研究のために大気サンプルを採取する主な方法は 2 つあります。1) 沈降 - 微生物の機械的沈降に基づく。 2）吸引 - 空気の積極的な吸引に基づいています（この方法により、細菌の定性的な含有量だけでなく、定量的な含有量も決定できます）。
空気サンプリング
沈降法
栄養培地 (MPA) を入れたシャーレは、床から異なるレベルに水平に開いた状態で設置されます。 この方法は、ペトリ皿内の寒天表面上の細菌の機械的沈降に基づいています。 予想される大気汚染に応じて、培地の入ったカップを 10 ～ 20 分間さらします。 病原菌叢を特定するには、選択培地が使用されます。 これらの場合の曝露は2〜3時間に延長され、曝露後、皿は閉じられ、実験室に運ばれ、温度37℃の恒温槽に24時間置かれます。翌日、成長したコロニーが研究されます。 。 この方法は主に密閉された空間で使用されます。
レチメンスキー細菌トラップ。 使用前に、デバイスには滅菌ソーダが充填されます。 装置の動作は、アスピレーターを使用して装置を通して空気を吸引することに基づいています。 この場合、装置内の液体が噴霧されます。 吸引終了後、空気を通した液をシャーレにMPA当たり0.1～0.2ml接種する。 選択培地を使用する必要がある場合は、種子の投与量を増やします (0.3 ～ 0.5 ml)。 レシーバーで得られた液体は、動物を感染させるために使用できます（たとえば、ウイルス、リケッチアなどを特定するために行われる研究など）。
ディアコノフの装置も、空気を通過させる液体中に細菌を捕捉することに基づいています。
PAB-1 装置は、短時間内に大量の空気の細菌学的研究を行うために設計されています。 空気サンプルは 125 ～ 150 l/分の速度で採取されます。 この装置の動作原理は、逆の電荷を有する電極上に微生物を捕捉することに基づいています。 この装置の空気サンプリングの高速性と、それをさまざまな栄養培地に接種できることは、病原性細菌や日和見細菌 (たとえば、外科部門の緑膿菌など) の検出に重要です。
クロトフの装置。 この動作は、空気のジェットがペトリ皿内の培地に当たる原理に基づいています。 この装置は、空気サンプリング用のユニット、回転計、供給機構の電気部分の 3 つの部分で構成されています。
4000 ～ 5000 rpm の速度で回転する遠心ファンを使用して、テスト対象の空気がデバイスのスロットに吸い込まれ、培地が入った開いたペトリ皿の表面に当たります。 空気中に含まれる微生物が寒天培地上に定着します。 微生物を表面全体に均一に行き渡らせるために、カップを置いたテーブルが回転します。 空気は、装置を通過する空気の速度を示す回転計に接続されたエア チューブを通じて装置から除去されます。
クロトフの装置の欠点は、電力を必要とするため、あらゆる状況で使用できるわけではないことです。
研究の初日
選択したサンプルを 37°C のサーモスタットに 18 ～ 24 時間置きます。
研修２日目
皿をサーモスタットから取り出し、コロニーを数えます。 細菌による大気汚染は、1立方メートル中の微生物の総数で表されます。
計算。 たとえば、10 分間に 125 リットルの空気が通過すると、表面に 100 個のコロニーが成長しました。
黄色ブドウ球菌を測定するには、卵黄塩寒天上でサンプルを収集します。 接種したディッシュをサーモスタット内で 37°C で 24 時間インキュベートし、室温で 24 時間保持して色素を同定します。 黄色ブドウ球菌であると疑われるコロニーはさらに特定する必要があります (第 14 章を参照)。
児童施設では、空気中のサルモネラ菌の有無が検査されます。 これを行うには、亜硫酸ビスマス寒天培地の入った皿に空気を接種します。
密閉空間の空気中の病原性細菌やウイルスの検出は、疫学的指標に従って行われます。 結核の病原体を特定するには、POV 装置が使用されます。捕集媒体としてシュコルニコワ培地が使用されます。
コントロールの質問
1. 空気は微生物の発育に好ましい環境ですか?
2. 空気微生物叢の日常的な研究を行っている機関はどこですか?
3. クロトフ装置の構造を説明してください。
タスク
10分間で250リットルの空気が通過しました。 150個のコロニーが成長しました。 空気1m中のコロニーの数を計算します。
エクササイズ
MPA 培地の入ったペトリ皿を 4 枚用意し、開いて床から異なる高さに置きます。 20分後、カップを閉めてサーモスタットに置きます。 翌日、成長したコロニーの数を数え、大気汚染の程度を判断します。
空気の衛生検査と微生物検査は分けて行うことができます 4段階に分けて：
1) サンプリング。
2) サンプルの処理、輸送、保管、微生物の濃縮物の取得（必要な場合）。
3）細菌学的播種、微生物の培養。
4) 分離された培養物の同定。
サンプルの選択:
適切なサンプリングにより、研究の正確さが保証されます。 密閉空間では、サンプリング ポイントは、封筒のように、面積 20 m2 ごとに 1 つの空気サンプルの割合で設定されます。部屋の隅に 4 つのポイント (壁から 0.5 m の距離) と部屋の 5 番目のポイントです。中心。 空気サンプルは床から 1.6 ～ 1.8 m の高さ、つまり住宅敷地内の呼吸レベルで採取されます。 サンプルは日中（人間の活動が活発な時間帯）に、部屋の湿式清掃と換気を行った後に採取する必要があります。 汚染源近くの地上0.5～2mの住宅地や緑地（公園、庭園など）の大気を検査して、大気微生物叢への影響を評価します。
空気サンプルを採取する場合、多くの場合、それを栄養培地に接種することに注意してください。
すべての空気サンプリング方法は、沈降法と吸引法に分類できます。
沈降- 最も古い方法であり、そのシンプルさとアクセシビリティにより広く使用されていますが、不正確です。 この方法は R. Koch によって提案され、重力の影響下および空気の動き (塵粒子やエアロゾル液滴とともに) の影響下で微生物が開いたペトリ皿内の栄養培地の表面に定着する能力に基づいています。 カップは水平面上のサンプリングポイントに設置されます。 総微生物汚染を測定する場合、肉ペプトン寒天培地を含むプレートは、細菌汚染の疑いの程度に応じて 5 ～ 10 分間、またはそれ以上開いたままにされます。 衛生的とされる微生物を同定するには、ガロ培地またはトゥルジェツキー培地 (連鎖球菌の検出用)、乳塩寒天培地または卵黄塩寒天培地 (ブドウ球菌の検出用)、麦芽寒天培地またはサブロー培地 (酵母菌および真菌の検出用) を使用します。 衛生指標微生物を測定する場合、カップは 40 ～ 60 分間開いたままにします。
曝露の終了後、すべての皿を閉じ、分離された微生物の発育に最適な温度で培養するためにサーモスタット内に 1 日置き、その後 (研究で必要な場合) 形成のために室温で 48 時間放置します。色素形成微生物による色素の生成。
沈降法には多くの欠点があります。エアロゾルの粗い部分のみが媒体の表面に沈降します。 コロニーは単一の細胞からではなく、微生物の集団から形成されることがよくあります。 空気微生物叢の一部だけが、使用される栄養培地で増殖します。 さらに、この方法は大気中の細菌汚染を研究するのにはまったく適していません。
より高度な方法は、 願望、空気中から高密度の栄養培地の表面または捕捉液体（肉ペプトンブロス、緩衝液、等張塩化ナトリウム溶液など）への微生物の強制堆積に基づいています。 吸引サンプリング中の衛生サービスの実践では、クロトフ装置、レクメンスキー細菌トラップ、空気サンプリング装置 (POV-1)、エアロゾル細菌サンプラー (PAB-1)、細菌ウイルス電気沈降装置 (BVEP-1)、キクテンコ装置、 Andersen 装置、Dyakonova、MB などが使用されます。大気を研究するには、Seitz 装置を使用して空気を吸引する膜フィルター No. 4 も使用できます。 楽器の種類が豊富であるということは、汎用的な装置が存在しないことと、多かれ少なかれその不完全性を示しています。
クロトフの装置。現在、この装置は室内空気の研究に広く使用されており、研究室でも利用できます。
クロトフの装置
クロトフ装置の動作原理（図 22）は、装置の蓋にあるくさび形のスロットを通して吸引された空気が栄養培地の表面に衝突し、塵やエアロゾルの粒子が付着するという事実に基づいています。培地に、そして空気中の微生物とともに。
細菌ウイルス電気沈降装置 (BVEP-1)。この装置は、吸引イオン化の動作原理に基づいています。 BVEP-1 は、電極が取り付けられた沈殿チャンバーで構成されます。空気が流入する導管の形をしたマイナスのチャンバーと、細菌が定着するプラスのチャンバーです。
MB デバイス。この装置は、一般的な微生物汚染を測定するだけでなく、さまざまなサイズのエアロゾル粒子を含む空気サンプルを採取するのにも役立ちます。 MB 装置は「ふるい」の原理に基づいて構築されており、6 つの水平ストリップに分割されたシリンダーであり、それぞれのストリップ上に MPA を含むペトリ皿が配置されます。 空気は最上部のステージから吸い込まれ、プレートの穴が最も大きく、ステージが下になるほど穴は小さくなります（後者を通過するのは空気エアロゾルの微細な部分だけです）。 この装置は、30 l/分の空気サンプリング速度でサイズ 1 ミクロンを超えるエアロゾル粒子を捕捉するように設計されています。 穴の数を減らすと、空気からのエアロゾルが栄養培地全体にさらに均一に分布します。 さらに小さなエアロゾル粒子を捕捉するには、AFA フィルター素材で作られた追加のフィルターを追加できます。
リストされている装置のいずれかを使用すると、得られる結果は近似値ですが、沈降法と比較して大気汚染のより正確な評価が得られます。 空気のサンプリングと衛生微生物学的研究はいずれも GOST によって規制されていないため、細菌による大気汚染の評価にはあらゆる装置を使用できます。 多くの場合、サンプリングは接種段階と組み合わされます。
密閉空間の空気中の微生物の数を減らすために、次の手段が使用されます: a) 化学的処理 - オゾン、二酸化窒素、乳酸の噴霧、b) 機械的 - 特殊なフィルターに空気を通過させる、c) 物理的 - 紫外線照射。
トピックに関する準備のための質問。
空気微生物叢の特徴。
空気中の微生物数とその測定。
衛生指標空気微生物とその識別。
空気は微生物の生存にとって好ましくない環境です。 微生物は土壌、水、人体、動物などから空気中に侵入し、空気中の栄養素を見つけられず、日射、乾燥、温度変化などの影響で徐々に死滅していきます。
空気中の微生物の数とその定性的組成は、気象条件、地表からの距離、微生物の存在などに応じて、大幅な制限内で変動します。 和解等 交通量の多い大都市の空気には最も多くの微生物が含まれており、森林や山の空気には最も微生物が含まれていませんが、上に行くほど大都市の上でも空気はきれいになります。 工業都市。 室内空間の空気には、 かなりの量微生物、特に大勢の人が集まる場所では。
空気中の微生物は、エアロゾルの形をした塵や湿気の粒子に付着しています。 エアロゾルは、固体物質の小さな粒子または噴霧状態の液体の液滴を含む、空気などの気体媒体からなるコロイド系です。 粒子の表面には吸着された空気の層があり、ガス媒体の存在により粒子が濡れるのを防ぎます。
エアロゾルの分散相の安定性は、粒子のサイズ、表面エネルギー、および粒子のサイズに依存します。 電荷。 微生物エアロゾルの動態では、3 つの段階が図式的に区別されます。
大きな核相。その粒子の直径は 0.1 mm 以上で、比較的早く沈降し、空気中での滞在時間は数秒です。
微核相、粒径 0.1 mm 未満。 これらの小さな液滴は、比表面積が大きく重量が軽いため、空気中に長時間留まり、かなり安定したコロイド系を形成し、その中の微生物は水分の層によって保護されます。
細菌粉塵段階。 エアロゾルの大核相と小核相の液滴は、徐々に沈降して乾燥し、いわゆる細菌粉塵に変化する可能性があり、その粒子サイズは 1 μm から 100 μm の細菌粉塵粒子が浮遊したままになります。空気中に長時間放置され、人の上気道や肺に浸透する可能性があります。
空中で 自然条件さまざまな微生物が最大 100 種存在し、そのほとんどが腐生植物です。
最も頻繁に見つかるものへ 屋外微生物には、さまざまな球菌、胞子の形をした胞子形成桿菌（Bacilluc nesentericus,3;.с.subtilis、Lao.mecateriui.i）が含まれます。
非胞子形成色素細菌 (serrc.tia narcescono)、Fenicilliuia 属、..s;-)ergillus 属、.D1C 酵母および酵母様真菌からの多数の真菌胞子。 大気中で作用する不利な要因に対して最も耐性があるのは、さまざまな系統群に属する色素微生物です。
ブドウ球菌、連鎖球菌、肺炎球菌、ジフテリア桿菌、結核菌、インフルエンザウイルス、水痘、麻疹、おたふく風邪など、日和見的で病原性の微生物が、特に屋内で人や動物から空気中に侵入する可能性があります。特に多くの微生物は、咳をするときに空気中に混入します。くしゃみをする、話す。 完全にさえ 健康な人くしゃみをするたびに放出されます 環境約10,000〜20,000の微生物。 たくさんの広がりの中で、 感染症いわゆる気性感染症、例えばインフルエンザ、水痘など、 非常に重要空気感染経路があります。 唾液や痰の液滴が乾燥すると、微生物がタンパク質の膜で保護されている液滴核小体の形成が起こる場合、後者は生存し続けることができます。 長い間。 したがって、ジフテリア菌は 24 時間、溶血性連鎖球菌は 2 日間、結核菌は 18 日間保存されます。 感染症の予防、医療産業企業や医療機関の作業場の空気管理などの目的で、衛生的および細菌学的空気検査が広く使用されています。 定義が含まれています 総数微生物
について
空気の T m (1000 l) における mov、つまり 空気および衛生状態を示す微生物の微生物数。
空気の微生物学的研究方法は沈降法と濾過法に分けられます。
沈降法のバリエーションとして空気衝撃法があります。 最も単純な方法はコッホ沈降法です。MPA を入れた滅菌ペトリ皿を次の条件で開きます。
空気サンプルを採取し、一定時間（通常は 5 分から 30 分）保管した後、密閉して 37 度のサーモスタット内に 24 時間置き、その後室温で 1 日放置する場所。 エアロゾル粒子に含まれる微生物は栄養培地に定着し、その上にコロニーを形成します。 成長したコロニーの数に基づいて、オメリャンスキーの法則を使用して空気中の微生物の数が計算されます。これによると、5分以内に面積100 cm2の栄養培地の表面に定着する微生物の数と同数と考えられます。 3リットルの空気中に含まれています。 成長したコロニーの数と暴露時間を知り、空気 1 (1000 リットル) に含まれる微生物の数を計算します。
コッホ法はシンプルで便利ではありますが、多くの欠点があります。まず、寒天上に沈降するのは比較的大きなエアロゾル粒子だけです。さらに、細菌の粉塵相の粒子は沈降せずに長時間空気中に浮遊する可能性があります。 、沈降プロセスは、気流の方向と力の影響を受けます。 コッホ法による播種はそうではありません。
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空気中のリケッチアとウイルスの数がわかります。
図92。 クロトフの装置（全体図）。
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図91。 クロトフ装置の図、([-円筒形本体; 2-本体ベース; 3-電気モーター; 4-遠心ファン; 5-8 枚羽根インペラ; 6-ディスク; 7-スプリング; 8-ペトリ皿; 9-装置カバー; 10 オン - 11 プレキシガラス ディスク、13 分割リング、15 アウトレット チューブ。
より進んだのは、クロトフ装置とインパクターを使用した空気微生物叢の機器研究の方法です（図91、92、93）。 クロトフの装置は円筒形の本体で、上部が取り外し可能な蓋で閉じられており、その下にMPAを含むペトリ皿が回転ディスク上に設置され、電気モーターがシリンダー内に配置され、後者は4〜5千の速度で回転します毎分回転数が高く、くさび形のスロットまたは穴を備えたプレキシガラスの蓋を通して空気を確実に吸引します。 結果として 乱流シリンダー内に空気を入れ、ペトリ皿を備えたディスクが回転すると、栄養培地の表面全体に微生物叢が均一に分布し、3 相すべてのエアロゾル粒子が積極的に吸い込まれます。 吸い込まれる空気の量を測定するように設計された回転計を使用すると、50 ～ 200 リットルの空気が装置を通過します。 サンプリング後、カップを閉じ、37°のサーモスタット内に 24 時間置き、その後室温で 24 時間置きます。 生育したコロニーの数を数え、通過した空気の量を知ることで、微生物数を簡単に計算できます。
図93。 4 段階のメイインパクターの図 (本文の説明を参照)。
インパクターは、空気が吸引されるカスケードである円錐形のノズルを備えたチューブを備えたデバイスです。 各ノズルの細い端の前に、グリセリンと生理食塩水で潤滑されたスライドガラスである受けプレートが配置されます。 ノズル付きチューブから空気が漏れていませんか？ 受けプレートに当たると微生物が定着します。 空気をサンプリングした後、スライドをインパクターから取り外し、定着した微生物を顕微鏡を使用して検査するか、ガラスを生理的溶液で洗い流し、そこから微生物を栄養培地に接種します。
空気を研究するための濾過方法は、微生物叢を吸着する特殊なフィルター、液体、粉末などによる濾過または吸引（吸引）に基づいています。
空気分析に使用されるフィルターには、綿、紙、メンブレン、ミリポアなどの不溶性フィルターと、グリセロールゼラチン、アルギン酸ナトリウム、砂糖などの可溶性フィルターがあります。
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粉末
適切な材質で作られたフィルタープレートをザイツ装置に設置し、真空ポンプを使用してフィルターを通して一定量の空気を吸引します。 次に、フィルタープレートを取り外し、生理学的溶液に浸して振盪し、微生物を溶液中に脱離させ、それから栄養培地上に定量的な接種を行います。 可溶性材料がフィルターとして使用される場合、空気を吸引した後、それらは滅菌生理的溶液に溶解されます。
ジャコノフの装置を使用すると、滅菌液体（水、生理食塩水、肉ペプトンブロスなど）を通して空気を吸引できます（図94）。
(G
t
VT
図94。 ジャコノフの装置
この装置は、容量 100 ～ 200 ml のガラスシリンダーで構成され、密閉された栓の中に 2 本のガラス管が挿入され、長い入口管は最下部で終わり、出口 (短い) 管は栓の直下で終わります。 空気を研究するときは、10〜20 mlの水を装置に注ぎ、ガラスビーズを入れて滅菌します。 滅菌後、出口チューブを真空ポンプに接続し、装置内を通過する空気量を測定するためのレオメーターを取り付け、100～200リットルの空気を吸引します。 装置の電源を切った後、空気をろ過した水 1 ml を取り、空の滅菌ペトリ皿に加え、溶融 MPA (+45°) 15 ml を注ぎます。 接種した皿を37°のサーモスタット内で1～2日間インキュベートし、その後増殖したコロニーの数を数え、濾過された空気の量を知ることで微生物数を計算します。
衛生的であることを示す微生物の存在は、水と土壌だけでなく密閉空間の空気でも測定されます。
それらは、Streptococcus viridans（ビリダンス連鎖球菌）（L型）、Str.haemolyticus（溶血性の性質を持つ溶血性連鎖球菌黄色ブドウ球菌）として認識されています。空気中にこれらの微生物が存在するということは、ヒトの上気道が微生物叢で汚染されていることを示しています。衛生状態を示す微生物の数。
について
1 m (1000 リットル) の空気中に含まれる溶連菌指数と呼ばれます。
衛生的であることを示す空気微生物を特定するには、上記のすべての方法が使用されますが、接種は選択的および鑑別診断培地で実行され、これらの細菌を迅速に検出し、空気微生物叢の他の代表からそれらを分離することが可能になります。 このような培地には、溶血性ブドウ球菌および連鎖球菌が溶血 (赤血球の破壊) ゾーンを与える血液寒天、黄色塩寒天などが含まれます。
冬と夏の住宅敷地内の空気を評価した結果を表 10 に示します。
表10
住宅敷地内の空気の衛生評価基準
について
(空気 1 m 中の微生物の数) 空気の評価 夏期すべての緑化およびすべての微量溶血性微生物レンサ球菌の冬期
マイクロ
組織
ビリダンスおよび溶血性連鎖球菌 純粋 1500 16 4500 36 汚染あり.... 2500 36 7000 124 研究の目的: 空気中の微生物数と衛生指標微生物の含有量を測定すること。
材料: MPA を含むペトリ皿、麦汁寒天および血液寒天、クロトフ装置。
進捗。 I. コッホ法を使用して微生物数を測定します。MPA、血液寒天、および麦汁寒天を入れたペトリ皿を実験室のさまざまな場所で 5 分間開いたままにします。 カップを閉じて、37°C のサーモスタットに 48 時間置きます。 成長したコロニーの数を数え、空気中の微生物の数を決定します (上記を参照)。
クロトフ装置を使用して、微生物の数と衛生状態を示す微生物の数を決定します。 MPA、血液寒天、麦汁寒天プレートを使用します。 それぞれについて
カップに 20 ～ 30 リットル/分の速度で 200 リットルの空気を流します。 サンプルを採取した後、カップを閉じて 37°のサーモスタットに 48 時間置きます。 成長したコロニーを数え、顕微鏡で観察し、塗抹標本を作成し、グラムで染色します。 血液寒天培地上に溶血ゾーンが存在することに注目してください。
2 つの方法で得られた結果を比較します。 空気の清浄度を評価します。 結果を表形式で提示します。
空気の健康評価
中程度 測定時のプレート上のコロニー数
クロトフ装置におけるコッホ法
IPA
血液寒天麦汁寒天
微生物数
緑の数と
溶血性の
連鎖球菌
文学
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